PECI CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406564

개요

ECI2는 과산화소체 D3,D2-에노일-CoA 이성질화효소(PECI)를 암호화하며, PECI는 불포화 지방산 아실-CoA의 과산화소체 β-산화에 필요한 보조 효소입니다. PECI는 사슬 단축이 계속 진행될 수 있도록 이성질화 단계를 촉매하고, 이어지는 탈수소화 및 티올분해 반응과의 연계를 가능하게 하여 지질 분해와 세포 에너지 항상성을 뒷받침합니다. 과산화소체 의존적 지방산 대사에서의 역할을 통해 ECI2는 지질 신호 조절, 산화환원 균형, 그리고 영양 스트레스 상황에서의 대사 적응에 기여합니다. 과산화소체 β-산화와 불포화 지방산 처리의 이상 조절은 대사질환의 기전, 지질 축적 형태, 그리고 암 및 신경퇴행 연구 맥락에서 관찰되는 광범위한 대사 재편성과 관련이 있습니다.

PECI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ECI2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ECI2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ECI2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PECI 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PECI 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ECI2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PECI 기능에 중요한 ECI2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ECI2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PECI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PECI CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ECI2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PECI HDR 플라스미드 (h) 및 PECI HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ECI2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ECI2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.