PDGF-B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (r): sc-437277

개요

PDGF-B는 혈소판유래성장인자(platelet-derived growth factor) 서브유닛 B를 암호화하며, 분비형 성장인자로서 동종이합체(homodimer) 또는 이종이합체(heterodimer)를 형성해 PDGFR 신호전달을 활성화하고, 하위의 PI3K–AKT 및 RAS–MAPK 경로를 촉진합니다. 랫드 세포에서 PDGF-B는 중간엽 세포의 증식과 이동, 페리사이트(pericyte) 모집, 혈관 성숙을 조절하며, 세포외기질 리모델링과 조직 항상성에 영향을 줍니다. PDGF-B에 의해 유도되는 신호는 상처 회복 및 섬유증식성 반응과도 교차하며, 조절 이상은 심혈관 및 신장 생물학과 관련된 병적 혈관신생과 비정상적 기질(stroma) 활성화와 연관됩니다. PDGF-B는 내피, 혈관벽(mural), 그리고 기질 구획 사이의 측분비(paracrine) 소통을 조절하기 때문에, 염증 연관 리모델링 및 종양 미세환경 역학을 다루는 모델에서 폭넓게 연구됩니다.

PDGF-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r)는 rat 세포주에서 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PDGF-B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PDGF-B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PDGF-B 기능에 중요한 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PDGF-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r) 및 PDGF-B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (r2)에 의해 암호화되는 gRNA는 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PDGF-B HDR 플라스미드 (r) 및 PDGF-B HDR 플라스미드 (r2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.