PDGF-A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400711

개요

PDGFA는 혈소판유래성장인자 A(PDGF-A)를 암호화하며, PDGF-A는 분비되는 이량체 성장인자로서 주로 PDGFRα를 통해 신호를 전달하여 중간엽 세포의 증식, 이동, 생존을 조절합니다. PDGF-A는 MAPK/ERK 및 PI3K/AKT 신호전달과 연계되는 유사분열 촉진 및 화학주성 반응의 핵심 동인으로, 세포외기질 재구성, 혈관신생 지원, 그리고 기질–상피 간 상호작용에 기여합니다. PDGF-A/PDGFR 신호의 이상 조절은 섬유화성 재형성과 종양 관련 기질 활성화에 관여하는 것으로 알려져 있으며, 세포주기 조절과 조직 미세환경 역학에 미치는 영향 때문에 자주 연구됩니다. PDGFA는 또한 발달 과정과 상처 치유 모델에서도 중요하게 다뤄지는데, 이들 과정에서는 측분비(paracrine) 성장인자 농도 구배가 세포 운명과 운동성을 형성합니다.

PDGF-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PDGFA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PDGFA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PDGFA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PDGF-A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PDGF-A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PDGFA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PDGF-A 기능에 중요한 PDGFA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PDGFA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PDGF-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PDGF-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PDGFA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PDGF-A HDR 플라스미드 (h) 및 PDGF-A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PDGFA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PDGFA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.