PARM-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406775

Panoramica

PARM1 codifica la proteina mucino-simile 1 regolata dagli androgeni nella prostata (PARM-1), una proteina mucino-simile associata al reticolo endoplasmatico, implicata nella regolazione dell’adattamento allo stress cellulare e dell’omeostasi della via secretoria. Le attività riportate collegano PARM-1 alla segnalazione della risposta alle proteine non correttamente ripiegate (unfolded protein response, UPR) e ai processi di controllo qualità del RE, che influenzano la sopravvivenza cellulare, la sensibilità all’apoptosi e i programmi di differenziamento. L’espressione di PARM1 risponde a segnali ormonali e dipendenti dal contesto tissutale ed è stata studiata in biologia epiteliale e in profili trascrizionali associati ai tumori. Queste caratteristiche rendono PARM1 un utile punto di partenza per studiare come le vie legate al RE plasmino la proteostasi, il controllo della crescita e fenotipi rilevanti per la malattia in sistemi modello umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PARM-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene PARM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del PARM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto PARM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PARM-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di PARM1 per lo studio della segnalazione di PARM-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni PARM1 critici per la funzione di PARM-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di PARM1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PARM-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PARM-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus PARM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PARM-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PARM-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia PARM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio PARM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.