PACAP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419000

개요

Adcyap1은 뇌하수체 아데닐릴 사이클레이스 활성화 폴리펩타이드(PACAP)를 암호화하며, PACAP는 보존된 신경펩타이드로서 주로 PAC1(ADCYAP1R1) 및 관련된 class B GPCR을 통해 신호를 전달해 cAMP/PKA, MAPK/ERK, 그리고 세포내 Ca²⁺ 경로를 조절한다. 마우스 조직에서 PACAP는 신경전달, 신경발달, 신경내분비 분비, 세포 스트레스 반응을 조절하며, 시냅스 가소성, 일주기 및 시상하부 항상성, 자율신경 조절에 영향을 준다. PACAP 신호는 신경계와 말초 구획에서 사이토카인 분비와 세포 생존 신호를 형성함으로써 염증 및 대사 프로그램과도 교차한다. ADCYAP1/PACAP 축의 조절 이상은 문헌에서 스트레스 관련 신경생물학, 통증 처리, 신경염증 기전과 연관되어 보고되어 왔으며, 신경계 및 면역 관련 맥락에서의 기전 연구를 뒷받침한다.

PACAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Adcyap1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Adcyap1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Adcyap1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PACAP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PACAP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Adcyap1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PACAP 기능에 중요한 Adcyap1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Adcyap1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PACAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 PACAP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Adcyap1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PACAP HDR 플라스미드 (m) 및 PACAP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Adcyap1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Adcyap1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.