Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) OPA1: sc-401555-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)OPA1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa OPA1 (h) y el plásmido de doble nickasa OPA1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a OPA1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: OPA1 Anticuerpo (D-9): sc-393296
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) OPA1 | sc-401555-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) OPA1 | sc-401555-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPA1 codifica una GTPasa tipo dinamina anclada a la membrana interna mitocondrial que regula la fusión de la membrana interna, la arquitectura de las crestas y la eficiencia de la cadena respiratoria. Mediante su coordinación con la maquinaria mitocondrial de fisión–fusión y el procesamiento proteolítico por OMA1 y YME1L, OPA1 ayuda a mantener el potencial de membrana mitocondrial y limita la movilización de citocromo c inducida por el estrés. La disfunción de OPA1 altera la fosforilación oxidativa, incrementa las especies reactivas de oxígeno y modifica la mitofagia y la sensibilidad a la apoptosis. Las variantes en OPA1 se asocian fuertemente con la atrofia óptica dominante y con fenotipos neurodegenerativos más amplios, lo que la convierte en una diana clave para la investigación sobre dinámica mitocondrial y bioenergética neuronal.
OPA1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus OPA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de OPA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de OPA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con OPA1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.