ODC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401055

개요

ODC1는 오르니틴을 푸트레신으로 전환하는 폴리아민 생합성의 속도결정 효소인 오르니틴 탈카복실화효소(ODC)를 암호화하며, 이는 DNA 복제, 염색질 조직화, 번역에 필요한 스페르미딘과 스페르민의 생성에 기여합니다. ODC 활성은 안티자임(antizyme) 매개 분해에 의해 엄격하게 조절되며, 아미노산 대사, mTOR 연계 성장 신호, 세포주기 진행과 통합적으로 맞물려 작동합니다. 폴리아민 대사의 이상 조절과 ODC1 발현 증가가 증식성 표현형, 대사 적응, 종양유전자성 전사 프로그램과 자주 연관되어 있어, ODC1는 성장 조절과 스트레스 반응을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 간주됩니다. 또한 ODC1의 교란은 폴리아민이 유전자 발현과 세포 적합도에 영향을 미치는 면역/염증 신호, 세포사멸, 산화 스트레스 완충과 관련된 연구에도 중요한 정보를 제공합니다.

ODC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ODC1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ODC1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ODC1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ODC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ODC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ODC1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ODC 기능에 중요한 ODC1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ODC1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ODC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ODC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ODC1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ODC HDR 플라스미드 (h) 및 ODC HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ODC1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ODC1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.