NUB1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424677

개요

Nub1(NEDD8 ultimate buster 1)은 NEDD8과 결합하는 인터페론 유도성 단백질인 NUB1을 암호화하며, NEDD8이 결합된 기질이 프로테아좀 의존적으로 제거되도록 촉진합니다. NUB1은 네딜화(neddylation)의 동역학과 cullin-RING E3 리가아제와 연관된 단백질의 턴오버를 조절함으로써 유비퀴틴–프로테아좀 시스템의 항상성, 세포주기 진행, 그리고 세포 스트레스 반응에 영향을 미칩니다. 또한 NUB1은 FAT10과 같은 유비퀴틴 유사 단백질과도 상호작용하여 선천면역 신호전달을 조절된 단백질 분해와 연결합니다. 이러한 경로의 조절 이상은 단백질 항상성(proteostasis) 불균형 및 염증성 신호전달 표현형과 자주 연관되므로, Nub1은 마우스 모델에서 기전 연구를 위한 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

NUB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nub1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nub1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nub1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NUB1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NUB1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nub1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NUB1 기능에 중요한 Nub1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nub1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NUB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NUB1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nub1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NUB1 HDR 플라스미드 (m) 및 NUB1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nub1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nub1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.