NPC1L1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401741-NIC

NPC1L1(Niemann-Pick C1-Like 1)은 콜레스테롤과 기타 스테롤의 세포 내 유입을 매개하는 다중 통과 막 단백질로, 장관 내 지질의 가용성을 세포 내 수송 및 대사 조절과 연결합니다. 사람 조직에서 NPC1L1은 스테롤 흡수를 지원하며, 엔도사이토시스 수송 경로 및 지질 처리 네트워크와의 조율된 상호작용을 통해 콜레스테롤 수치의 항상성 조절에 기여합니다. 또한 그 활성은 스테롤 수송, 막 지질 조성, 지단백 대사를 관장하는 경로들과 기능적으로 연관되어 있습니다. NPC1L1 관련 과정의 조절 이상은 고콜레스테롤혈증, 죽상동맥경화 위험 생물학, 대사 질환 기전 연구에서 중요한 의미를 갖습니다.

NPC1L1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 NPC1L1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 NPC1L1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 NPC1L1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, NPC1L1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.