NNT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421922

개요

Mouse Nnt는 니코틴아마이드 뉴클레오타이드 트랜스하이드로게나아제(NNT)를 암호화하며, NNT는 미토콘드리아 내막에 존재하는 효소로서 양성자 구동력(proton motive force)을 NAD(H)와 NADP(H) 사이의 하이드라이드(hydride) 전달에 결합시킵니다. NNT는 미토콘드리아 NADPH를 생성함으로써 글루타티온 및 티오레독신 의존성 항산화 시스템을 지원하고, 산화적 인산화 과정에서 산화환원 항상성(redox homeostasis)을 유지하는 데 도움을 줍니다. NNT 활성은 미토콘드리아 대사, 활성산소종(ROS) 처리, 그리고 산화 스트레스에 의해 유발되는 기능장애에 대한 취약성에 영향을 미칩니다. Nnt/NNT 기능의 변화는 대사적 표현형 및 스트레스 반응 저하와 연관된 것으로 보고되어, 미토콘드리아 생물에너지학과 산화환원 조절 신호전달을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

NNT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nnt 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nnt 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nnt의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NNT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NNT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nnt 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NNT 기능에 중요한 Nnt 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nnt 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NNT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 NNT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nnt 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NNT HDR 플라스미드 (m) 및 NNT HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nnt 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nnt 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.