Plásmido Doble Nickase (h) Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2: sc-401641-NIC

CHRNB2 codifica la subunidad β2 de los receptores nicotínicos neuronales de acetilcolina, canales iónicos activados por ligando que se ensamblan como heteropentámeros con otras subunidades de nAChR para mediar la transmisión sináptica rápida. Tras la unión de acetilcolina o nicotina, los receptores que contienen β2 conducen cationes, elevando el Na⁺ y el Ca²⁺ intracelulares y acoplándose a redes de señalización dependientes de la actividad que moldean la excitabilidad, la liberación de neurotransmisores y la plasticidad sináptica. Esta señalización colinérgica se cruza con vías que regulan la homeostasis del calcio, la señalización MAPK/ERK y la función de los circuitos dopaminérgicos. La variación genética o la expresión alterada de CHRNB2 se ha vinculado a fenotipos neuropsiquiátricos y del neurodesarrollo, y también se estudia en el contexto de la dependencia a la nicotina y de trastornos relacionados con las convulsiones.

Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CHRNB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CHRNB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CHRNB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CHRNB2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.