Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401641

Visão geral

CHRNB2 codifica a subunidade β2 dos receptores nicotínicos neuronais de acetilcolina (nAChRs), canais catiônicos regulados por ligante que se montam como pentâmeros heteroméricos com subunidades α para regular a excitabilidade da membrana. Após a ligação de acetilcolina ou nicotina, os nAChRs que contêm β2 mediam o influxo de Na⁺ e Ca²⁺, acoplando a sinalização colinérgica a vias dependentes de cálcio que influenciam a liberação de neurotransmissores, a plasticidade sináptica e o desenvolvimento de circuitos. A atividade de CHRNB2 cruza-se com processos que governam recompensa, atenção e vigília por meio da modulação de redes dopaminérgicas e de outros sistemas neuromodulatórios. Alterações genéticas e funcionais em CHRNB2 têm sido associadas a fenótipos neuropsiquiátricos e à suscetibilidade a crises convulsivas, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos em modelos neuronais.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CHRNB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CHRNB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CHRNB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CHRNB2 para a investigação da sinalização de Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CHRNB2 críticos para a função Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CHRNB2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CHRNB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CHRNB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CHRNB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.