Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Niban Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405758
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Niban El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Niban, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Niban Anticuerpo (F-10): sc-374636
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Niban Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405758 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FAM129A codifica Niban, una proteína citoplasmática sensible al estrés implicada en la regulación de la supervivencia celular y la adaptación a condiciones adversas como el estrés oxidativo y el estrés del retículo endoplásmico. Niban se ha relacionado con la modulación de la apoptosis y de la señalización asociada a la autofagia, y se estudia con frecuencia en el contexto de las salidas de las vías PI3K/AKT y MAPK que determinan la proliferación y la tolerancia al estrés. Se ha descrito una expresión alterada de FAM129A en múltiples tipos de cáncer y se utiliza como un indicador molecular de la aptitud de las células tumorales y de su adaptación al estrés. Estas características convierten a Niban en un objetivo útil para desentrañar redes de señalización que acoplan las respuestas celulares al estrés con el control del crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Niban (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM129A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM129A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM129A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Niban.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM129A para la investigación de la señalización de Niban, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FAM129A críticos para la función de Niban
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM129A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Niban CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Niban CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM129A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Niban (h) y el plásmido HDR Niban (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM129A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM129A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.