Neurensin-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423681

Panoramica

Nrsn1 codifica Neurensin-1, una proteina associata alla membrana, arricchita nei neuroni, implicata nel traffico endosomiale e nell’organizzazione dei compartimenti vescicolari all’interno dei neuriti. Neurensin-1 è stata collegata a processi che supportano lo sviluppo e il mantenimento delle sinapsi, inclusa la regolazione dello smistamento del carico e della dinamica delle membrane intracellulari importanti per la connettività neuronale. Un’alterata espressione di Nrsn1 o il suo contesto di rete è stata associata a fenotipi di tipo neuroevolutivo e neuropsichiatrico in studi genetici su topo e sull’uomo, evidenziandone la rilevanza per i circuiti che governano il comportamento. Come marcatore e modulatore del traffico di membrana neuronale, Neurensin-1 è utile per indagare le vie che collegano la funzione degli endosomi alla struttura sinaptica e all’omeostasi neuronale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurensin-1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Nrsn1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Nrsn1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Nrsn1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Neurensin-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Nrsn1 per lo studio della segnalazione di Neurensin-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Nrsn1 critici per la funzione di Neurensin-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Nrsn1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Nrsn1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Neurensin-1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Neurensin-1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Nrsn1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Nrsn1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.