Plasmide Double Nickase (m) Nectin 2: sc-422541-NIC

Nectin2 (PVRL2/CD112) code la nectine 2, une molécule d’adhérence cellulaire de la superfamille des immunoglobulines, concentrée au niveau des jonctions d’adhérence, où elle favorise des contacts cellule–cellule indépendants du Ca2+, la polarité épithéliale et l’architecture tissulaire via des interactions avec l’afadine et le cytosquelette d’actine. En coordonnant l’assemblage et le remodelage des jonctions, la nectine 2 influence des processus tels que la migration cellulaire, la fonction barrière et la signalisation dépendante du contact. Dans le contexte immunitaire, la nectine 2 peut servir de ligand pour des récepteurs tels que DNAM-1 (CD226) et TIGIT, reliant ainsi son expression à la régulation de l’engagement des lymphocytes cytotoxiques et de la surveillance immunitaire. Une expression ou une localisation dérégulée de la nectine 2 a été associée à des phénotypes d’adhérence altérés et à des mécanismes liés à l’échappement immunitaire, étudiés en biologie du cancer et dans des contextes inflammatoires.

Nectin 2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nectin2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nectin2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nectin2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nectin2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.