Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
NDRG1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421841
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NDRG1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在NDRG1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NDRG1: sc-398291，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NDRG1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421841 | 20 µg | $397.00 |
概述
Ndrg1 编码 NDRG1，这是一种位于细胞质的蛋白，可被细胞应激和分化信号诱导表达，参与调控细胞生长、谱系决定以及对缺氧的应答。在小鼠细胞中，NDRG1 与铁稳态、囊泡运输和细胞骨架组织等通路相关，并可在不同情境下对细胞增殖与运动程序产生不同影响。NDRG1 还与外周神经系统的髓鞘生物学有关，并已在神经退行性疾病及脱髓鞘性周围神经病变模型中被研究。Ndrg1 表达的改变也被用于探讨肿瘤生物学和转移相关表型，进一步支持其在信号传导与应激适应研究中的重要性。
NDRG1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ndrg1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ndrg1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ndrg1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使NDRG1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Ndrg1缺失的细胞模型，用于NDRG1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 NDRG1 功能至关重要的 Ndrg1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Ndrg1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 NDRG1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 NDRG1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ndrg1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 NDRG1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 NDRG1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ndrg1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ndrg1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。