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N-cadherin双切口酶质粒(h) | sc-400109-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
N-cadherin双切口酶质粒(h2) | sc-400109-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH2 编码人类细胞-细胞黏附受体 N-钙黏蛋白(N-cadherin)。N-钙黏蛋白是一种钙依赖性的钙黏蛋白家族成员,可通过同源性结合(homophilic binding),并与连环蛋白(catenins)及肌动蛋白细胞骨架耦联,从而稳定黏着连接(adherens junctions)。N-钙黏蛋白通过协调连接结构重塑、机械力传导(mechanotransduction)以及细胞极性相关程序,调控组织形态发生、神经元发育和细胞群体迁移。它与多条信号通路发生交互,包括 β-连环蛋白/Wnt 信号、Rho 家族 GTP 酶驱动的细胞骨架动态变化,以及受体酪氨酸激酶信号,从而影响细胞增殖与运动能力。CDH2 表达水平或定位的失调与上皮-间充质可塑性改变、侵袭性行为增强,以及血管与神经细胞生物学中与疾病相关的变化有关。
N-cadherin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CDH2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CDH2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CDH2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CDH2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。