Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MYBPC3 Double Nickase Plasmid (h): sc-401409-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MYBPC3 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MYBPC3 Double-Nickase-Plasmid (h) und MYBPC3 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MYBPC3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MYBPC3: sc-137237
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MYBPC3 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401409-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYBPC3 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401409-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYBPC3 kodiert das kardiale Myosin-bindende Protein C, ein sarkomerisches Accessory-Protein des dicken Filaments, das den Querbrückenzyklus zwischen Aktin und Myosin moduliert und zur Stabilisierung sowie Regulation der Kontraktionsfunktion beiträgt. Über phosphorylierungsabhängige Interaktionen mit Myosin und Titin hilft MYBPC3, die kalziumempfindliche Kontraktilität fein abzustimmen, und unterstützt die geordnete Assemblierung und Aufrechterhaltung des kardialen Sarkomers. Eine veränderte Expression oder Funktion von MYBPC3 stört die myofibrilläre Organisation und die myokardiale Mechanik, wodurch dieses Gen mit erblichen Kardiomyopathie-Phänotypen und Signalwegen des kardialen Remodelings verknüpft ist. Als strukturelles Gen des menschlichen Herzens ist MYBPC3 breit in Modellen der Sarkomerbiologie, Mechanotransduktion und Kardiomyozytenreifung untersucht.
MYBPC3 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MYBPC3-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MYBPC3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MYBPC3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MYBPC3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.