MLF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421659
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MLF1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MLF1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MLF1 Anticuerpo (D-1): sc-514294
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MLF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421659 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino **Mlf1** codifica el factor 1 de leucemia mieloide (MLF1), un regulador conservado del comportamiento de las células hematopoyéticas que participa en el control transcripcional y en procesos vinculados al ciclo celular. Se ha implicado a MLF1 en la modulación del compromiso de linaje y de las respuestas al estrés celular mediante interacciones con factores nucleares que influyen en programas de proliferación y diferenciación. La actividad alterada de MLF1 se asocia con una biología mieloide desregulada y con vías relevantes para la leucemogénesis, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar mecanismos que conectan la regulación transcripcional con el control del crecimiento. En sistemas experimentales, la perturbación de **Mlf1** puede ayudar a investigar cómo se estabilizan o desestabilizan los estados de células hematopoyéticas e inmunitarias ante señales oncogénicas o de diferenciación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MLF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mlf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mlf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mlf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MLF1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mlf1 para la investigación de la señalización de MLF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Mlf1 críticos para la función de MLF1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mlf1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MLF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MLF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mlf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MLF1 (m) y el plásmido HDR MLF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mlf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mlf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.