Plasmide CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m): sc-426433
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MIZIP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MIZIP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MIZIP Antibody (E-4): sc-398514
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m) | sc-426433 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Zmynd19 code MIZIP, une protéine associée à des doigts de zinc et interagissant avec MYC, impliquée dans la régulation de programmes transcriptionnels liés à la croissance et à la différenciation cellulaires. Par son association avec MYC et avec des complexes protéiques présumés dépendants de doigts de zinc, MIZIP est supposée moduler des réseaux d’expression génique qui coordonnent la prolifération, le métabolisme cellulaire et la spécification de lignée. Une dérégulation du contrôle transcriptionnel centré sur MYC est largement impliquée dans des phénotypes oncogéniques et développementaux, ce qui fait de Zmynd19 un nœud utile pour disséquer une régulation transcriptionnelle dépendante du contexte. Dans les modèles murins, la perturbation de MIZIP peut aider à préciser comment des co‑régulateurs façonnent les voies pilotées par MYC et les états cellulaires en aval.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Zmynd19 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Zmynd19, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Zmynd19 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MIZIP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Zmynd19 pour l'étude de la signalisation de MIZIP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Zmynd19 essentiels à la fonction de MIZIP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Zmynd19 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MIZIP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le MIZIP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Zmynd19. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MIZIP plasmide HDR (m) et le MIZIP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Zmynd19 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Zmynd19 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.