Metallothionein 3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421733

개요

Mt3는 메탈로티오네인 3(MT3)를 암호화하는 유전자로, 시스테인 함량이 높은 금속 결합 단백질인 MT3는 세포 내 아연과 구리의 이용 가능성을 조절하고 산화 스트레스 및 전자친화성(친전자성) 스트레스에 대한 세포 방어에 기여합니다. MT3는 산화환원 활성이 있는 금속을 완충하고 아연 의존적 신호전달을 조율함으로써, 활성산소종(ROS) 항상성, 단백질 항상성(프로테오스타시스), 미토콘드리아 기능과 연관된 경로에 영향을 줄 수 있습니다. 마우스 조직에서 MT3 발현은 신경계에서 두드러지며, 신경세포 분화, 시냅스 기능, 금속 관련 신경독성과의 관련성 측면에서 연구되어 왔습니다. MT3가 관여하는 비정상적인 금속 처리 및 산화 스트레스 기전은 신경퇴행 및 염증 연관 조직 손상 모델과도 관련이 있습니다.

Metallothionein 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mt3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mt3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mt3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Metallothionein 3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Metallothionein 3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mt3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Metallothionein 3 기능에 중요한 Mt3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mt3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Metallothionein 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Metallothionein 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mt3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Metallothionein 3 HDR 플라스미드 (m) 및 Metallothionein 3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mt3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mt3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.