Mena Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420173
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mena O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Mena, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mena Anticorpo (21): sc-135988
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mena Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420173 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Enah codifica a Mena (mammalian enabled), uma proteína reguladora de actina da família Ena/VASP que promove o alongamento de filamentos e coordena o acoplamento actina–membrana em lamelipódios, filopódios e sítios de adesão. Mena integra sinais de GTPases da família Rho, de vias de adesão focal mediadas por integrinas e de estímulos de fatores de crescimento para moldar a polaridade celular, a migração e a morfogénese tecidual. Em sistemas murinos, a atividade de Enah é frequentemente investigada em contextos como desenvolvimento neural, remodelação epitelial e dinâmica do citoesqueleto subjacente ao comportamento celular invasivo. A desregulação da remodelação de actina dependente de Ena/VASP está amplamente associada a alterações em programas de motilidade celular relevantes para a biologia do cancro e para fenótipos do neurodesenvolvimento em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mena (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Enah em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Enah, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Enah na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mena.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Enah para a investigação da sinalização de Mena, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Enah críticos para a função Mena
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Enah para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Mena Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Mena Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Enah. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Mena Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Mena (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Enah para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Enah definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.