MBD3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421578

개요

Mbd3는 메틸-CpG 결합 도메인 단백질 3(MBD3)을 암호화하며, MBD3는 ATP 의존적 크로마틴 리모델링과 히스톤 탈아세틸화를 결합해 전사 프로그램을 조절하는 NuRD(뉴클레오좀 리모델링 및 탈아세틸화) 복합체의 핵심 소단위입니다. 생쥐 세포에서 MBD3는 프로모터와 인핸서의 접근성을 조율함으로써 계통(라인리지) 결정, 다분화능 전환, 복제와 연동된 크로마틴 조직화의 후성유전학적 제어에 기여합니다. NuRD 의존적 억제와 발달 유전자 네트워크의 미세 조정을 통해 MBD3는 세포 운명 결정과 유전체 안정성에 영향을 미칩니다. MBD3/NuRD 활성의 이상 조절은 발달 표현형 및 암 관련 후성유전학적 리모델링과 연관된 분화 상태 변화와 전사 조절 이상과 연결되어 왔습니다.

MBD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Mbd3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mbd3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mbd3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MBD3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MBD3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mbd3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MBD3 기능에 중요한 Mbd3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mbd3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MBD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MBD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mbd3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MBD3 HDR 플라스미드 (m) 및 MBD3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mbd3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mbd3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.