MAP-1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400981
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAP-1B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MAP-1B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MAP-1B Anticorpo (H-8): sc-365668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAP-1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400981 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAP1B codifica a proteína associada a microtúbulos 1B (MAP-1B), um regulador do citoesqueleto neuronal que se liga a microtúbulos e a complexos associados à actina para sustentar o crescimento de neuritos, a orientação axonal e a dinâmica do cone de crescimento. A MAP-1B contribui para a estabilização dos microtúbulos, a remodelação do citoesqueleto e processos de transporte intracelular que moldam a polarização neuronal e a formação de circuitos. As suas funções dependentes de fosforilação intersetam vias de sinalização que regulam a plasticidade do citoesqueleto e o desenvolvimento sináptico. A desregulação da expressão ou da função de MAP1B tem sido associada a mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neurodegenerativas, tornando-a um alvo útil para estudar relações estrutura–função nos neurónios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAP1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAP1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAP1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MAP-1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAP1B para a investigação da sinalização de MAP-1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAP1B críticos para a função MAP-1B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAP1B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MAP-1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MAP-1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAP1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MAP-1B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MAP-1B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAP1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAP1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.