M-cadherin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401232

Descripción general

CDH15 codifica la M-cadherina, un receptor de adhesión célula–célula dependiente de calcio enriquecido en el músculo esquelético, que favorece el reconocimiento, la alineación y la fusión de mioblastos durante la miogénesis y la regeneración muscular. A través de uniones mediadas por cadherinas y su conexión con β-catenina/p120-catenina y el citoesqueleto de actina, la M-cadherina contribuye a la señalización dependiente del contacto que influye en la remodelación del citoesqueleto, la migración y los programas de diferenciación. La actividad de CDH15 se entrecruza con vías que regulan la dinámica de las uniones adherentes y puede modular respuestas celulares relevantes para la reparación y la remodelación tisular. La expresión alterada de cadherinas, incluida CDH15, se ha asociado con cambios en la adhesión celular y el comportamiento invasivo en contextos de enfermedad, lo que la hace relevante para estudios de interacciones célula–célula en tumores y de la fisiopatología asociada al músculo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO M-cadherin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDH15 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDH15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDH15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína M-cadherin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDH15 para la investigación de la señalización de M-cadherin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CDH15 críticos para la función de M-cadherin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDH15 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido M-cadherin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido M-cadherin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDH15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR M-cadherin (h) y el plásmido HDR M-cadherin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDH15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDH15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.