LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421462

개요

Zbtb7a는 LRF/Pokemon을 암호화하는데, 이는 BTB/POZ 아연-핑거 전사인자로서 서열 특이적 DNA 결합과 코리프레서(corepressor) 복합체의 모집을 통해 세포 계통(라인리지) 결정, 증식, 생존을 조절한다. 조혈 및 면역 맥락에서 LRF/Pokemon은 B세포와 T세포의 발달 프로그램을 조율하고, 적혈구 계열의 성숙에 영향을 주며, 분화와 연관된 전사 네트워크를 조절한다. LRF/Pokemon은 ARF–p53 종양억제 신호의 기능적 길항을 포함해 세포주기 체크포인트와 스트레스 반응을 제어하는 경로들과 교차하며, 표적 유전자 좌위에서 염색질 상태를 재구성할 수도 있다. Zbtb7a 활성의 변화는 조혈계 및 고형암 모델에서 종양성 전사 프로그램과 비정상적 분화 표현형에 관여하는 것으로 보고되어, 종양형성 및 세포 운명 조절의 기전을 연구하는 데 중요한 표적으로 여겨진다.

LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Zbtb7a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Zbtb7a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Zbtb7a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LRF/Pokemon 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LRF/Pokemon 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Zbtb7a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LRF/Pokemon 기능에 중요한 Zbtb7a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Zbtb7a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 LRF/Pokemon CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Zbtb7a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LRF/Pokemon HDR 플라스미드 (m) 및 LRF/Pokemon HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Zbtb7a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Zbtb7a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.