Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Laminin β-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402612-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Laminin β-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Laminin β-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Laminin β-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LAMB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Laminin β-2 Anticorpo (C4): sc-59980
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Laminin β-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402612-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Laminin β-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402612-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMB2 codifica a laminina β-2, uma subunidade essencial de glicoproteína da matriz extracelular que se monta em heterotrímeros de laminina nas membranas basais. A laminina β-2 sustenta a adesão, migração e polarização celulares ao ligar a matriz a recetores como integrinas e distroglicano, coordenando assim a organização do citoesqueleto e a sinalização de sobrevivência. É particularmente relevante para membranas basais especializadas, incluindo as da barreira de filtração glomerular e das sinapses neuromusculares, onde ajuda a manter a integridade estrutural e a função específica do tecido. Alterações na expressão de LAMB2 ou variantes patogénicas estão associadas a fenótipos de disfunção da membrana basal, tornando-o um alvo útil para estudar a sinalização entre matriz extracelular e célula e vias relacionadas com a filtração ou a arquitetura sináptica.
Laminin β-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LAMB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LAMB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LAMB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LAMB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.