KLHL9 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-433908

개요

Klhl9는 마우스 KLHL9 단백질을 암호화하며, KLHL9는 BTB–BACK–Kelch 패밀리에 속하는 기질 어댑터로서 CUL3–RBX1 E3 유비퀴틴 리가아제 복합체와 협력하여 특정 표적(클라이언트) 단백질의 유비퀴틴화를 촉진하고, 프로테아좀 의존적 분해를 통해 해당 단백질의 턴오버를 유도합니다. 이러한 유비퀴틴 매개 단백질 항상성(프로테오스타시스) 조절을 통해 KLHL9는 단백질 품질 관리, 세포주기 연관 과정, 그리고 적시에 기질이 제거되어야 하는 신호 출력의 조절에 기여합니다. CUL3–KLHL 어댑터의 교란은 신경발달, 신경근 생물학, 암 관련 프로테옴 리모델링에 관여하는 유비퀴틴 경로의 이상 조절과 폭넓게 연관되어 있어, Klhl9는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템의 특이성을 연구하는 데 유용한 핵심 노드가 됩니다. 마우스 모델에서 기능 상실(loss-of-function) 접근법을 사용하면, KLHL9 의존적 기질 선택이 특정 조직 또는 세포 유형에서 하위 세포 표현형을 어떻게 형성하는지 규명할 수 있습니다.

KLHL9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Klhl9 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Klhl9 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Klhl9의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 KLHL9 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 KLHL9 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Klhl9 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• KLHL9 기능에 중요한 Klhl9 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Klhl9 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• KLHL9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 KLHL9 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Klhl9 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  KLHL9 HDR 플라스미드 (m) 및 KLHL9 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Klhl9 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Klhl9 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.