KIAA1731 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406955

개요

CEP295(KIAA1731)는 중심립 조립과 중심체 성숙에 필수적인 중심체 단백질을 암호화하며, 중심립 주위 물질(pericentriolar material, PCM)의 형성과 정상적인 미세소관 조직화 중심(microtubule-organizing center, MTOC) 기능을 지원합니다. 또한 중심립-중심체 전환(centriole-to-centrosome conversion), 중심체 복제, 그리고 유사분열 동안의 정확한 방추체 형성을 조율하는 과정에 관여함으로써 유전체 안정성에 기여합니다. CEP295 의존적 중심체 무결성이 손상되면 비정상적인 유사분열 진행과 염색체 불안정성이 유발될 수 있으며, 이는 암 생물학에서 흔히 연구되는 세포 상태입니다. CEP295는 섬모 형성(ciliogenesis) 및 세포 주기 조절 연구에서도 중요하게 다뤄지는데, 중심체 결함이 신호 전달 역학과 분화 프로그램을 변화시킬 수 있기 때문입니다.

KIAA1731 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CEP295 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CEP295 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CEP295의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 KIAA1731 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 KIAA1731 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CEP295 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• KIAA1731 기능에 중요한 CEP295 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CEP295 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• KIAA1731 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 KIAA1731 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CEP295 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  KIAA1731 HDR 플라스미드 (h) 및 KIAA1731 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CEP295 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CEP295 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.