Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
JIP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401634
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JIP-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico JIP-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:JIP-1 Anticorpo (2J8): sc-53552
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JIP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401634 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAPK8IP1 codifica a JIP-1 (proteína 1 interagente com JNK), uma proteína neuronal de andaime (scaffold) que organiza módulos de MAPK ao coordenar MAP3Ks, MKK7 e JNK (MAPK8), moldando a amplitude e a localização da sinalização ativada por estresse. A JIP-1 também interage com a maquinaria de transporte axonal e contribui para o tráfego polarizado e o crescimento de neuritos, conectando a transdução de sinais à dinâmica do citoesqueleto e ao movimento de cargas. Por meio da modulação de programas transcricionais e apoptóticos dependentes de JNK, MAPK8IP1 tem sido investigado em contextos de neurodegeneração, respostas neuronais a lesão e vias de estresse metabólico. A desregulação do papel de andaime da JIP-1 pode alterar a especificidade das quinases e a expressão gênica a jusante, tornando-a um nó útil para dissecar a arquitetura das vias de MAPK em modelos de células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO JIP-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAPK8IP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAPK8IP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAPK8IP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína JIP-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAPK8IP1 para a investigação da sinalização de JIP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAPK8IP1 críticos para a função JIP-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAPK8IP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo JIP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo JIP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAPK8IP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo JIP-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR JIP-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAPK8IP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAPK8IP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.