Islet-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421157

개요

마우스 Isl1 유전자는 LIM-홈도메인 전사인자인 Islet-1(ISL1)을 암호화하며, ISL1은 발달 중인 신경계, 췌장, 심혈관 조직에서 계통(lineage) 지정과 분화를 조절하는 핵심 조절자입니다. ISL1은 LIM 결합 보조인자 및 홈박스 네트워크와의 맥락 의존적 상호작용을 통해 전구세포 유지, 세포 운명 결정, 성숙을 제어하는 전사 프로그램을 조율합니다. 췌장 섬(islet) 생물학에서는 Isl1이 내분비 유전자 발현과 기능적 성숙을 뒷받침하며, 운동신경 및 심장 전구세포에서는 패터닝과 형태형성에 기여합니다. 따라서 ISL1 활성의 이상은 마우스 모델에서 당뇨병 관련 섬 기능장애의 기전 연구, 선천성 심장 발달, 신경발달 경로 연구와 관련성이 큽니다.

Islet-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Isl1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Isl1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Isl1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Islet-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Islet-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Isl1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Islet-1 기능에 중요한 Isl1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Isl1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Islet-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Islet-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Isl1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Islet-1 HDR 플라스미드 (m) 및 Islet-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Isl1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Isl1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.