IP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421031

概要

Cxcl10 はケモカイン IP-10（CXCL10）をコードしており、IP-10 は分泌性のインターフェロン誘導性リガンドとして CXCR3 に結合し、活性化 T 細胞、NK 細胞、その他の免疫細胞集団の走化性を誘導します。IP-10 は一般に IFN-γ/STAT1 下流や病原体認識経路によって誘導され、白血球のトラフィッキング、内皮活性化、炎症性サイトカインネットワークの形成に関与します。マウスモデルでは、Cxcl10 は感染または損傷組織への免疫細胞動員に寄与し、防御免疫と免疫病理のバランスに影響を与えます。CXCL10 シグナルの制御異常は、慢性炎症、自己免疫様応答、腫瘍免疫微小環境のリモデリングに関する研究において、しばしばマーカーおよび機序上の重要な結節点として用いられます。

IP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCxcl10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cxcl10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cxcl10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IP-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IP-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cxcl10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IP-10の機能に不可欠なCxcl10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cxcl10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIP-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cxcl10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IP-10 HDRプラスミド（m）および IP-10 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCxcl10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCxcl10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。