IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431212

Übersicht

Igf2bp1 kodiert das RNA-bindende Protein IMP-1/IGF2BP1, einen posttranskriptionellen Regulator, der Ziel-mRNAs über KH-Domänen erkennt und deren Lokalisation, Stabilität und Translation moduliert. In Mauszellen trägt IGF2BP1 dazu bei, Programme zu koordinieren, die mit Wachstum und Differenzierung verknüpft sind, indem es das Schicksal von mRNAs in Ribonukleoprotein-Granula und entlang zytoskelettaler Transportwege steuert. Sein regulatorisches Netzwerk überschneidet sich mit proliferations- und entwicklungsbezogenen Signalachsen und wird häufig im Hinblick auf Effekte auf Zellzustandsübergänge, migrationsassoziierte RNA-Lokalisation und Translationkontrolle untersucht. Fehlregulierte, mit IGF2BP1 assoziierte RNA-Programme wurden mit onkogenen Phänotypen und einer veränderten Gewebehomöostase in Verbindung gebracht, was IGF2BP1 für mechanistische Studien der Genexpressionsregulation in krankheitsrelevanten Modellen bedeutsam macht.

Das IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Igf2bp1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Igf2bp1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Igf2bp1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IMP-1/IGF2BP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Igf2bp1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IMP-1/IGF2BP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Igf2bp1-Exone abzielen, die für die IMP-1/IGF2BP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Igf2bp1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Igf2bp1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IMP-1/IGF2BP1 HDR-Plasmid (m) und IMP-1/IGF2BP1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Igf2bp1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Igf2bp1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.