IL-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421112

概要

Il5はインターロイキン5（IL-5）をコードしており、IL-5はTh2関連サイトカインとして、好酸球系譜への分化コミットメント、生存、活性化を統括するとともに、マウスにおけるB細胞の増殖およびクラススイッチを支持します。IL-5はIL-5受容体（IL5RAと共通β鎖）を介してシグナルを伝達し、JAK/STAT、MAPK、PI3K経路を作動させることで、2型免疫プログラムや顆粒球のトラフィッキングを形成します。IL-5活性の制御異常は、好酸球主導の炎症やアレルギー性気道反応と関連しており、Il5は粘膜免疫を制御するサイトカインネットワークを解明するうえで中心的なノードとなります。実験モデルでは、Il5の改変（摂動）は、蠕虫応答およびアレルギー性炎症における白血球分化、走化性回路、サイトカインのクロストークを研究するために用いられます。

IL-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-5の機能に不可欠なIl5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-5 HDRプラスミド（m）および IL-5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。