Particules Lentivirales d'Activation (m) IL-34: sc-429354-LAC

Le gène murin *Il34* code l’interleukine‑34 (IL‑34), une cytokine sécrétée qui transmet ses signaux principalement via CSF1R afin de réguler la survie, la prolifération et la différenciation des phagocytes mononucléés. L’IL‑34 contribue à l’homéostasie des macrophages et de la microglie, en façonnant les populations myéloïdes résidentes des tissus et en influençant les programmes de signalisation inflammatoire. En modulant le recrutement et l’activation des cellules myéloïdes, l’IL‑34 est pertinente pour les études sur la neuroinflammation, le remodelage osseux et la régulation immunitaire dans des modèles de maladies inflammatoires chroniques et neurodégénératives. Son expression et l’activité de sa voie sont également utilisées pour étudier le dialogue médié par les cytokines entre les cellules stromales et les compartiments myéloïdes dans des microenvironnements associés à la maladie.

Les particules d'activation lentivirales IL-34 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Il34 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IL-34 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Il34, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IL-34. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Il34 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.