Plasmide Double Nickase (h) IL-1α: sc-418057-NIC

L’IL1A humain code l’interleukine‑1 alpha (IL‑1α), une cytokine pro‑inflammatoire produite par les lignées épithéliales et myéloïdes, capable d’agir à la fois comme ligand associé à la membrane et comme alarmin libéré lors de lésions cellulaires. L’IL‑1α transmet principalement son signal via IL‑1R1, déclenchant des cascades dépendantes de MyD88 qui activent les voies NF‑κB et MAPK, et induisent la transcription de chimiokines, de molécules d’adhérence et de cytokines secondaires. Cet axe contribue au recrutement des leucocytes, à la fièvre et aux réponses de phase aiguë, ainsi qu’au remodelage coordonné des compartiments stromal et endothélial lors de l’inflammation. Une activité d’IL‑1α dérégulée est impliquée dans des affections inflammatoires chroniques et dans l’inflammation associée aux tumeurs, faisant d’IL1A un nœud pertinent pour analyser les réseaux de cytokines et la signalisation de l’immunité innée.

IL-1α Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL1A.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.