Plásmido Doble Nickase (h) IFN-γRβ: sc-402794-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IFN-γRβ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFN-γRβ (h) y el plásmido de doble nickasa IFN-γRβ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IFNGR2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFN-γRβ Anticuerpo (A-11): sc-377291
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IFN-γRβ | sc-402794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IFN-γRβ | sc-402794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor 2 de interferón gamma (IFNGR2) codifica IFN-γRβ, la subunidad accesoria de señalización del complejo receptor del interferón de tipo II, que se asocia con IFNGR1 para mediar las respuestas celulares al interferón-γ. Tras la unión del ligando, IFN-γRβ favorece la activación del eje JAK1/JAK2–STAT1, promoviendo programas transcripcionales dependientes de STAT1 que modulan la presentación de antígenos, la activación de macrófagos y la inmunidad antimicrobiana. La función de IFNGR2 influye en la comunicación cruzada con vías inflamatorias y de regulación inmunitaria más amplias, incluidas las redes de genes estimulados por interferón y los circuitos de señalización de citocinas. Las alteraciones genéticas o funcionales de IFNGR2 se asocian con una respuesta deficiente al IFN-γ y con susceptibilidad a infecciones graves, lo que lo convierte en un objetivo clave para desentrañar mecanismos de defensa del huésped y de desregulación inmunitaria.
IFN-γRβ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IFNGR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IFNGR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IFNGR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IFNGR2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.