HSPA6 Plasmide Double Nickase (h): sc-400870-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSPA6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSPA6 Double Nickase Plasmid (h) e il HSPA6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HSPA6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HSPA6 Antibody (G-9): sc-374589
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSPA6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSPA6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA6 codifica un membro inducibile dallo stress della famiglia di chaperoni HSP70, che stabilizza le proteine nascenti e danneggiate e contribuisce a ristabilire la proteostasi in seguito a uno stress cellulare acuto. HSPA6 partecipa al ripiegamento proteico ATP-dipendente, alla prevenzione dell’aggregazione proteica e al recupero del proteoma dopo shock termico, stress ossidativo e insulti proteotossici, interfacciandosi con vie come la risposta allo shock termico, la gestione delle proteine non ripiegate e il controllo qualità proteico. Influenzando la capacità di ripiegamento e la disponibilità di chaperoni, l’espressione di HSPA6 può modulare la suscettibilità cellulare alla disfunzione indotta dallo stress, rendendola rilevante per studi sullo squilibrio della proteostasi osservato nella neurodegenerazione, nell’adattamento delle cellule tumorali allo stress e nei microambienti infiammatori.
HSPA6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HSPA6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HSPA6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HSPA6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HSPA6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.