Plasmide Double Nickase (h) HoxB3: sc-405460-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxB3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxB3 Double Nickase (h) et le plasmide HoxB3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXB3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxB3 | sc-405460-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxB3 | sc-405460-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB3 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxB3, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique de séquence, qui contribue à établir la polarité antéro-postérieure et l’identité segmentaire au cours du développement embryonnaire. Dans les cellules humaines, HoxB3 module des programmes transcriptionnels liés à la spécification des lignages, à la différenciation et à des réseaux de signalisation pilotés par des morphogènes, lesquels coordonnent l’état de la chromatine et l’expression des gènes du développement. Une expression dérégulée de HOXB3 a été associée à des états de différenciation altérés et à des circuits transcriptionnels oncogéniques dans plusieurs contextes tumoraux, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier la reprogrammation développementale. L’étude expérimentale de HOXB3 soutient des recherches sur les réseaux de régulation génique, le contrôle épigénétique du destin cellulaire et la fonction des facteurs de transcription dépendante du contexte.
HoxB3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXB3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXB3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXB3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXB3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.