Histone cluster 1 H1E Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402775

Descripción general

HIST1H1E codifica la histona del clúster 1 H1E, una variante de la histona enlazadora H1 dependiente de la replicación que se une al ADN nucleosomal para estabilizar la estructura de la cromatina de orden superior e influir en la compactación del genoma. Al modular la accesibilidad de la cromatina, H1E ayuda a regular programas transcripcionales, el momento de la replicación del ADN y las respuestas al daño del ADN mediante efectos sobre la remodelación de la cromatina y el reclutamiento de factores de reparación. Las alteraciones en la estequiometría de la familia H1 y en la dinámica de las histonas enlazadoras se han asociado con la desregulación epigenética observada en el cáncer y en trastornos del neurodesarrollo, y las perturbaciones relacionadas con HIST1H1E pueden afectar las decisiones de destino celular y la estabilidad genómica. Como parte del locus del clúster de histonas 1, HIST1H1E también es relevante para estudios de la expresión de histonas acoplada a la fase S y del ensamblaje de la cromatina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Histone cluster 1 H1E (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HIST1H1E en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HIST1H1E junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HIST1H1E tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Histone cluster 1 H1E.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HIST1H1E para la investigación de la señalización de Histone cluster 1 H1E, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HIST1H1E críticos para la función de Histone cluster 1 H1E
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HIST1H1E para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HIST1H1E. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Histone cluster 1 H1E (h) y el plásmido HDR Histone cluster 1 H1E (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HIST1H1E para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HIST1H1E definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.