HAH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404870-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HAH1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HAH1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HAH1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATOX1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HAH1 Anticorpo (D-9): sc-398742
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HAH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404870-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HAH1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404870-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATOX1 (HAH1) codifica uma chaperona citosólica de cobre que se liga a Cu(I) e o entrega às ATPases do tipo P ATP7A e ATP7B, dando suporte ao carregamento de cobre na via secretora e à manutenção da homeostase celular do cobre. Por meio dessa função de tráfego, HAH1 influencia a maturação de enzimas dependentes de cobre e ajuda a coordenar o equilíbrio redox e processos de sinalização responsivos a metais. A desregulação do manejo de cobre mediado por ATOX1 tem sido associada a alterações nas respostas ao estresse oxidativo e em vias relevantes para distúrbios do metabolismo do cobre, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para o estudo da proteostase dependente de metais. Em células humanas, ATOX1 também serve como um nó-modelo para examinar como a distribuição de cobre se conecta ao tráfego intracelular e à adaptação ao estresse.
HAH1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATOX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATOX1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATOX1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATOX1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.