GW182 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400906

개요

TNRC6A는 microRNA 유도 침묵 복합체(miRISC)의 핵심 스캐폴드 구성요소로서 전사 후 유전자 억제를 조율하는 GW182를 암호화합니다. GW182는 Argonaute 단백질에 결합하고 CCR4–NOT 및 PAN2–PAN3 데아데닐화 효소 복합체를 모집하여, 세포질 P-body 내에서 mRNA의 데아데닐화, 디캡핑, 번역 억제를 촉진합니다. 이러한 상호작용을 통해 TNRC6A는 세포주기 조절, 분화, 스트레스 반응, 선천면역 신호전달에 영향을 미치는 microRNA 기반 유전자 발현 프로그램의 형성에 기여합니다. GW182 관련 침묵 네트워크의 이상 조절은 암과 신경계 질환을 포함한 다양한 질환 맥락에서 관찰되는 비정상적 전사체 조절과 연관되어 있어, TNRC6A는 기전적 RNA 생물학 연구에 유용한 표적 노드로 여겨집니다.

GW182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TNRC6A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TNRC6A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TNRC6A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GW182 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GW182 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TNRC6A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GW182 기능에 중요한 TNRC6A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TNRC6A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GW182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GW182 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TNRC6A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GW182 HDR 플라스미드 (h) 및 GW182 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TNRC6A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TNRC6A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.