GFRαL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-436523

개요

마우스 Gfral 유전자는 GFRαL(GFRAL)을 암호화하는데, 이는 글리코실포스파티딜이노시톨(GPI)로 막에 고정된 보조 수용체로서 GDF15에 선택적으로 결합하고 RET 수용체 티로신 키나아제를 통해 신호를 전달합니다. 이 경로는 하위 MAPK/ERK 및 PI3K/AKT 신호전달을 활성화하여 에너지 균형, 섭식 행동, 전신 대사 항상성을 조절하는 신경 회로를 조절합니다. GFRAL 발현은 식욕 조절에 관여하는 후뇌 영역에서 풍부하게 나타나며, 전임상 모델에서 GDF15–GFRAL–RET 신호가 체중 조절 및 스트레스 연관 식욕부진(거식) 유사 반응과 연결됨을 시사합니다. 따라서 Gfral은 신경-대사 신호전달, 악액질 관련 생물학, 그리고 염증성 신호가 중추에서의 대사 조절과 어떻게 연결되는지를 밝히는 기전 연구에서 널리 연구되고 있습니다.

GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Gfral 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Gfral 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Gfral의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GFRαL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GFRαL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Gfral 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GFRαL 기능에 중요한 Gfral 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Gfral 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 GFRαL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Gfral 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GFRαL HDR 플라스미드 (m) 및 GFRαL HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Gfral 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Gfral 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.