GCSH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406784

개요

GCSH는 글리신 절단계(glycine cleavage system)의 H 단백질을 암호화하며, 미토콘드리아에 존재하는 리포산(lipoate) 결합 운반체로서 글리신 탈카복실화효소(P 단백질), 아미노메틸트랜스퍼레이스(T 단백질), 디하이드로리포아마이드 탈수소효소(L 단백질) 사이에서 반응 중간체를 셔틀처럼 전달합니다. 이 다효소 복합체를 통해 GCSH는 글리신 분해를 엽산 의존적 탄소 단위 전달과 연결함으로써 글리신 이화작용과 일탄소 대사를 지원하고, 미토콘드리아의 아미노산 회전율을 세포의 산화환원 및 대사 항상성과 연계합니다. 글리신 절단 활성의 교란은 미토콘드리아 기능 변화 및 글리신/세린 플럭스의 불균형과 관련되며, 이는 신경대사 조절 이상과 연관된 과정입니다. 리포산 의존 효소반응과 엽산 매개 경로를 잇는 연결 지점으로서 GCSH는 미토콘드리아 대사, 산화 스트레스 반응, 그리고 글리신 처리의 선천성 대사 이상(inborn errors) 맥락에서 자주 연구됩니다.

GCSH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 GCSH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GCSH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GCSH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 GCSH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 GCSH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GCSH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• GCSH 기능에 중요한 GCSH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GCSH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• GCSH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 GCSH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GCSH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  GCSH HDR 플라스미드 (h) 및 GCSH HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GCSH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GCSH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.