GCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430769

概要

Gcm2 は転写因子 GCM2 をコードしており、DNA に結合して系譜特異的な遺伝子発現プログラムを制御する「glial cells missing」ファミリーの一員です。マウスの発生において GCM2 は副甲状腺の規定と維持に不可欠であり、副甲状腺ホルモン関連経路の制御を通じてカルシウムおよびリン酸の恒常性を支える転写ネットワークを統括します。Gcm2 の破綻は分化や内分泌組織としての同一性を乱すため、器官形成における転写制御を研究するうえで有用な結節点となります。GCM2 機能の変化は、副甲状腺の発生異常やミネラル代謝の調節不全といった表現型に関連しており、内分泌・代謝疾患の機序モデルにおける重要性を裏づけています。

GCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGcm2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gcm2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gcm2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GCM2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GCM2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gcm2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GCM2の機能に不可欠なGcm2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gcm2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGCM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gcm2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GCM2 HDRプラスミド（m）および GCM2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGcm2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGcm2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。