FRY CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404629

개요

FRY(furry homolog)는 NDR/LATS 계열 세린/트레오닌 키나아제의 하위에서 기능하는, 크고 진화적으로 보존된 스캐폴드 단백질을 암호화하며, 세포 극성, 세포골격 조직화, 그리고 극성화된 소포 수송을 조절하는 신호들을 조정합니다. 이러한 경로를 통해 FRY는 조직 발달과 항상성에 밀접하게 연결된 과정인 세포 형태형성, 이동, 상피 조직화의 조절에 기여합니다. FRY 기능의 변화는 암 생물학을 비롯해 세포 구조가 손상되는 여러 질환에서 흔히 관여하는 비정상적 성장 신호 및 극성 결함과 연관되어 왔습니다. 키나아제 중심 신호 네트워크의 조절자로서 FRY는 Hippo 관련 조절, 세포골격 역학, 그리고 맥락 특이적 스트레스 반응에 대한 기전 연구에서 관심을 받는 표적입니다.

FRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FRY 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FRY 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FRY의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FRY 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FRY 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FRY 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FRY 기능에 중요한 FRY 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FRY 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FRY CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FRY 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FRY HDR 플라스미드 (h) 및 FRY HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FRY 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FRY 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.