fibrillin-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406714

개요

FBN2는 피브릴린-2(fibrillin-2)를 암호화하며, 피브릴린-2는 미세섬유(microfibril)로 중합되어 탄성섬유 조립과 결합조직 구조 형성에 기여하는 큰 세포외기질 당단백질입니다. 피브릴린-2를 포함하는 미세섬유는 구조적 지지체 역할을 하는 동시에 성장인자의 생체이용가능성(bioavailability)을 조절하여 형태형성 및 조직 항상성을 관장하는 TGF-β, BMP 등의 신호 경로에 영향을 줍니다. 또한 피브릴린-2는 인테그린(integrin) 및 기질 연관 단백질과의 상호작용을 통해 세포 부착, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 세포외기질 리모델링을 조절합니다. FBN2의 유전적 교란은 선천성 결합조직 관련 표현형과 연관되어 있어, 발생 과정의 기질 생물학과 성장인자 신호의 조절 이상을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FBN2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FBN2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FBN2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 fibrillin-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 fibrillin-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FBN2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• fibrillin-2 기능에 중요한 FBN2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FBN2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 fibrillin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FBN2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  fibrillin-2 HDR 플라스미드 (h) 및 fibrillin-2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FBN2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FBN2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.