FHL-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403541

개요

FHL1은 네 개 반과 LIM 도메인을 가진 단백질 1(four-and-a-half LIM domains protein 1, FHL-1)을 암호화하며, FHL-1은 횡문근에 풍부한 LIM-전용 어댑터 단백질로서 근절(sarcomere)과 코스타미어(costamere)에서 다단백질 복합체를 스캐폴딩(지지체 역할)하여 조직화합니다. FHL-1은 근육 분화와 재형성에 관여하는 신호 전달 노드와 구조 단백질을 연결함으로써 세포골격 조직화, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 그리고 전사적 출력(transcriptional outputs)을 조율합니다. FHL1 기능의 변화는 유전성 근병증 및 심근병증과 연관되어 있으며, 이때 단백질–단백질 상호작용의 붕괴가 근절의 완전성과 스트레스 반응 경로를 교란할 수 있습니다. 근육 생물학 외에도 FHL-1은 LIM 도메인 매개 신호 복합체 조립과, 맥락 의존적인 유전자 발현 조절을 연구하기 위한 모델로 활용되어 왔습니다.

FHL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FHL1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FHL1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FHL1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FHL-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FHL-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FHL1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FHL-1 기능에 중요한 FHL1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FHL1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FHL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FHL-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FHL1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FHL-1 HDR 플라스미드 (h) 및 FHL-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FHL1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FHL1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.