FEN-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403168

개요

FEN1은 플랩 엔도뉴클레아제 1(FEN-1)을 암호화하며, FEN-1은 구조 특이적 뉴클레아제로서 오카자키 절편 성숙 과정과 롱패치 염기 절제 수선(long-patch base excision repair) 동안 생성되는 5′ 플랩 중간체를 절단합니다. FEN-1은 PCNA 및 DNA 중합효소들과 협력하여 DNA 복제의 정확성, 정지된 복제 포크의 처리, 그리고 유전체 불안정을 유발할 수 있는 이차 DNA 구조의 해소를 지원합니다. 복제 스트레스 반응, 수선 경로 선택, 염색체 무결성 유지에서의 역할을 통해 FEN1 기능의 변화는 돌연변이 축적 및 암 생물학과 DNA 손상 민감성과 연관된 돌연변이 시그니처와 연결됩니다. 따라서 FEN-1은 DNA 수선 네트워크, 복제 연계 처리 과정, 체크포인트 신호전달을 연구하기 위한 기전적 출발점으로 널리 활용됩니다.

FEN-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FEN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FEN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FEN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FEN-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FEN-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FEN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FEN-1 기능에 중요한 FEN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FEN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FEN-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FEN-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FEN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FEN-1 HDR 플라스미드 (h) 및 FEN-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FEN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FEN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.