Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403708-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FatsoO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Fatso (h) e o Plasmídeo Double Nickase Fatso (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FTO. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fatso Anticorpo (C-3): sc-271713
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O FTO humano (Fatso) codifica uma desmetilase de ácidos nucleicos dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que remove N6-metiladenosina (m6A) e modificações metílicas relacionadas do RNA, moldando assim o splicing, a estabilidade e a tradução do mRNA. Por meio do controle epitranscritômico, o FTO influencia a homeostase energética celular, a adipogênese e programas de detecção de nutrientes, com efeitos a jusante em vias ligadas à função mitocondrial e às respostas ao estresse metabólico. Variações genéticas ou expressão desregulada de FTO têm sido associadas ao risco de obesidade e a fenótipos metabólicos mais amplos, e a atividade alterada de FTO é estudada em contextos que envolvem controle de crescimento e diferenciação celular. Essas propriedades fazem do FTO um alvo amplamente utilizado para investigar a regulação da expressão gênica dependente de metilação de RNA em células humanas.
Fatso O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FTO em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FTO. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FTO. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FTO interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.